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骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞常用的分離方法有哪些
骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞常用的分離方法有哪些
更新時(shí)間:2022-04-25 | 點(diǎn)擊率:1624
骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞
是骨髓基質(zhì)干細(xì)胞,是人們?cè)诓溉閯?dòng)物的骨髓基質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的一種具有分化形成骨、軟骨、脂肪、神經(jīng)及成肌細(xì)胞的多種分化潛能的細(xì)胞亞群。它們對(duì)骨髓中的造血干細(xì)胞(HSC)不僅有機(jī)械支持作用,還能分泌多種生長(zhǎng)因子(如IL-6,IL-11,LIF,M-CSF及SCF等)來支持造血。
目前常用的分離MSC的方法主要有全骨髓法和密度梯度離心法,全骨髓法即根據(jù)干細(xì)胞在低血清培養(yǎng)基中有貼壁優(yōu)勢(shì)特性,定期換液除去不貼壁細(xì)胞,從而達(dá)到純化及擴(kuò)增MSC的目的。密度梯度離心法即根據(jù)骨髓中各細(xì)胞成分比重的不同,分離單核細(xì)胞進(jìn)行貼壁培養(yǎng)。二者本質(zhì)上無(wú)多大區(qū)別。隨著對(duì)MSC表面抗原認(rèn)識(shí)的深入,又有人利用免疫方法如流式細(xì)胞儀法、免疫磁珠法等對(duì)其進(jìn)行分離純化。但經(jīng)過流式或磁珠分選后的細(xì)胞出現(xiàn)了增殖緩慢等一些問題,加之成本較高和技術(shù)的難度,在某種程度上限制了這些方法的廣泛應(yīng)用。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí),骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞單獨(dú)應(yīng)用可以較好地促進(jìn)骨折愈合和軟骨損傷的修復(fù),通過體外培養(yǎng)使其覆蓋于陶瓷支架或碳纖維網(wǎng)絡(luò)等再植入患處效果更明顯。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外培養(yǎng),因具有黏附于塑料培養(yǎng)皿壁的能力而易于分享,體外經(jīng)過長(zhǎng)期連續(xù)培養(yǎng)和冷凍保存后不會(huì)改變其分化潛能,植入以后可以分化成造血以外的組織,如肺、軟骨、骨、神經(jīng)等,并表現(xiàn)出相應(yīng)組織細(xì)胞的表型。
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