小鼠原代星形膠質(zhì)細胞詳述:
星形膠質(zhì)細胞,是膠質(zhì)細胞中體積最大的一種。從胞體發(fā)出許多長而分支的突起,伸展充填在神經(jīng)細胞的胞體及其突起之間,起支持和分隔神經(jīng)細胞的作用。
纖維性星形膠質(zhì)細胞多分布在腦脊髓的皮質(zhì),突起細長,分支較少,胞質(zhì)中含,多分布在灰質(zhì),細胞突起粗短,分支多。胞質(zhì)內(nèi)膠質(zhì)絲較少,又稱苔狀細胞。電鏡下星形膠質(zhì)細胞的胞核有缺失,胞質(zhì)較清亮,游離核糖核蛋白體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)均很少,糖原顆粒豐富,有大量的膠質(zhì)絲。纖維形星形膠質(zhì)細胞的突起呈長圓柱形,而原漿性星形膠質(zhì)細胞的突起呈薄片狀,并常包裹著神經(jīng)細胞及其突觸。星形膠質(zhì)細胞的腳板與血管內(nèi)皮細胞之間相隔一層基板,腳板質(zhì)膜與基板接觸處有半橋粒結(jié)構(gòu)。
神經(jīng)科學(xué)研究中的重要模型,它們在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中扮演著多種角色,包括支持和維護神經(jīng)元生存、供能以及調(diào)節(jié)神經(jīng)元活動等。星形膠質(zhì)細胞可以根據(jù)其形態(tài)和功能被分為原生質(zhì)型和纖維型兩種亞型。它們表達特定的標記物,如膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP),這是成熟星形膠質(zhì)細胞的一個標志。
在實驗室中,研究人員可以通過特定的培養(yǎng)技術(shù)從新生小鼠的腦組織中分離和培養(yǎng)星形膠質(zhì)細胞。這些細胞在體外培養(yǎng)時會展現(xiàn)出典型的星形形態(tài),并且可以通過免疫熒光染色等技術(shù)進行鑒定。例如,可以使用抗GFAP抗體來標記星形膠質(zhì)細胞,而其他標記物如S100-β和谷氨酸轉(zhuǎn)運蛋白(EAAT1)也可以用來確認細胞的身份。
在進行原代培養(yǎng)時,研究人員通常會選擇新生24小時內(nèi)的小鼠,因為這時候的腦組織更容易被解離成單細胞。通過物理方法將腦組織分散成單細胞后,可以在含有DMEM/F12培養(yǎng)基、胎牛血清(FBS)和胰蛋白酶等的培養(yǎng)條件下進行培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中,星形膠質(zhì)細胞會逐漸從其他類型的細胞中分離出來,并在培養(yǎng)皿中形成單層。
小鼠原代星形膠質(zhì)細胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常腦組織。
2)細胞鑒定:神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)免疫熒光染色法。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:星狀細胞,貼壁培養(yǎng)。
運輸形式:
低溫:(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
常溫: (2) T25瓶復(fù)蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
生物安全:
1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
2. 建議在復(fù)蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。
注意:凍存管浸沒在液氮中會泄漏,并會慢慢充滿液氮。解凍時,液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。